大家好，关于实验室大肠杆菌培养基的 *** 很多朋友都还不太明白，不知道是什么意思，那么今天我就来为大家分享一下关于大肠杆菌培养基制备的相关知识，文章篇幅可能较长，还望大家耐心阅读，希望本篇文章对各位有所帮助！

1如何 *** 大肠杆菌的培养基？？

大肠杆菌很好培养，普通的蛋白胨牛肉膏培养基就行：1000ml水、牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、PH7.2-7.4

或者直接用土豆培养基就可以了。

2我想要大肠杆菌液体培养所需要的培养基和 *** 过程 越详细越好 谢谢

GYT培养基（Tung and Chow 1995）

10%(v/v)甘油

0.125%(m/v)酵母提取物

0.25%(m/v)胰化蛋白胨

使用0.22um滤器过滤除菌，分装成2.5ml一份，保存于4℃。

LB（Luria-Bertani）培养基

配制每升培养基，应在950ml去离子水中加入：

胰化蛋白胨 10g

酵母提取物 5g

NaCl 10 g

摇动容器直至溶质溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

M9培养基

配制1L培养基，应在750m1无菌去离子水(冷至50℃或50℃以下)中加入：

5×M9盐溶液 200ml

1 mol/LMgSO4 2 ml

适当碳源的20%溶液(如20%葡萄糖) 20ml

1 mol/LCaCl2 0.1 ml

灭菌的去离子水至980ml。

如果需要，可在M9培养基中补加适当氨基酸和维生素的贮存液。

5×M9盐溶液配制：用无离子水溶解下列盐类，终体积为1L：

Na2HPO4·7H2O 64g

KHPO4 15g

NaCl 2.5g

NH4Cl 5.0g

分装成200ml一份，在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌15min。

分别配制MgSO4溶液和CaCl2溶液，高压灭菌。用无菌水将5×M9盐溶液稀释至980ml后，加入MgSO4和CaCl2溶液。葡萄糖溶液在加到稀释的M9盐溶液之前，用0.22um滤器过滤除菌。当使用含有染色体上脯氨酸生物合成操纵子缺陷[△(lac-proAB)]的大肠杆菌以及互补的proAB基因在F'质粒上时，在M9基本培养基中补加下列成分：

0.4%(m/v)葡萄糖(右旋糖)

5mM MgSO4·7H2O

0.01%硫胺

NZCYM培养基

配制每升培养基，在950ml去离子水中加入：

NZ胺 10g

NaCl 5g

酵母提取物 5g

酪蛋白水解物 1g

MgSO4·7H2O 2g

摇动容器直至溶质完全溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。

在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

NZ胺：酪蛋白酶促水解物(ICN Biochemicals公司)。

NZCYM、NZYM和NZM也可用BD Biscienses公司的脱水培养基。

NZYM培养基

NZYM培养基除不含酪蛋白水解物外，其他成分与NZCYM培养基相同。

NZM培养基

NZM培养基除不含酵母提取物外，其他成分与NZYM培养基相同。

SOB培养基

配制每升培养基，在950ml去离子水中加入：

胰化蛋白胨 20g

酵母提取物 5g

NaCl 0.5 g

摇动容器使溶质完全溶解。加10ml 250mmol／L KCl溶液(将1.86g KCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L NaOH!调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15 psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。该溶液在使用前，加入5ml灭菌的2 mol/l MgCl2[2mol／L MgCl2溶液的配制 *** 如下：用90ml去离子水溶解19g MgCl2，用去离子水调整体积为100ml，在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min]。

SOC培养基

SOC培养基除含有20mmol／L葡萄糖外，其他成分与SOB培养基相同。SOB培养基经高压灭菌后冷至60℃或60℃以下，加20ml除菌的1mol／L葡萄糖溶液(1mol/l葡萄糖溶液的配制 *** 是：用90ml去离子水溶解18g葡萄糖，完全溶解后，用去离子水定容至100ml，用0.22um滤器过滤除菌)。

Terrific肉汤(又称TB培养基，Tartof and Hobbs 1987)

配制每升培养基，在900ml去离子水中加入：

胰化蛋白胨 12g

酵母提取物 24g

甘油 4ml

摇动容器使溶质完全溶解。然后在15psi(1.05 kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。当溶液冷至60℃或60℃以下时加入100ml无菌的0.17mol/L KH2PO4，0.72mol/L K2HPO4溶液[该溶液的配制 *** 是：用90ml去离子水溶解2.31g KH2PO4和12.54g K2HPO4，完全溶解后，用去离子水定容至100ml并在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

2×YT培养基

配制每升培养基，在900ml去离子水中加入：

胰化蛋白胨 16g

酵母提取物 10g

NaCl 5g

摇动容器直至溶质溶解，用5N NaOH调pH值至7.0，用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

3大肠杆菌怎么培养的

大肠杆菌一般培养 ***

使用牛肉膏蛋白胨培养基

组成成分：牛肉膏 3g,蛋白胨 10g,Nacl 5g,琼脂 15～20g,水1000mL,PH7.4～7.6。

具体配置步骤：

1.称药品 按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中.牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放入热水中,牛肉膏使与称量纸分离,立即取出纸片.蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速.

2.加热溶解 在烧杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量.若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入己溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分.

3. 调pH 检测培养基的pH,若pH偏酸,可滴加lmol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围.若偏碱,则用lmol/L HCl进行调节.pH的调节通常放在加琼脂之前.应注意pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度.

4.过滤 液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利培养的观察.但是供一般使用的培养基,这步可省略.

5.分装 按实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内.分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染. 分装量:固体培养基约为试管高度的l/5,灭菌后制成斜面.分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜.半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.

6.加棉塞 试管口和三角瓶口塞上用普通棉花(非脱脂棉) *** 的棉塞.棉塞的形状,大小和松紧度要合适,四周紧贴管壁,不留缝隙,才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用.要使棉塞总长约3/5塞入试管口或瓶口内,以防棉塞脱落.有些微生物需要更好的通气,则可用8层纱布制成通气塞.有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞.

7.包扎 加塞后,将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸,以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞.若培养基分装于试管中,则应以5支或7支在一起,再于棉塞外包一层牛皮纸,用绳扎好.然后用记号笔注明,培养基名称,组别,日期.

8.灭菌 将上述培养基于121.3℃湿热灭菌20min.如因特殊情况不能及时灭菌,则应故人冰箱内暂存.

9.无菌检查 将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h,无菌生长即可使用,或贮存于冰箱或清洁的橱内,备用.

大肠杆菌的培养：

37摄氏度，恒温培养48到72小时，因为接种时和具体培养条件的不同，其生长一般都在2天外才能长出明显的菌落。

菌落特征：乳白色，圆形，菌落边缘整齐，表面光滑，表面和背面颜色一致

OK，本文到此结束，希望对大家有所帮助。